本文標題："宿主細胞培養(yǎng)物或生物研究圖像顯微鏡"
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宿主細胞培養(yǎng)物或生物研究圖像顯微鏡
蛋白質(zhì)純化的特定要求變化很大，工業(yè)上用的許多酶其實并不很純
，但是，只要它們能夠勝任工作，也就足夠了。“加工”用酶(如
口一淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶)被成噸地生產(chǎn)，主要以細菌培養(yǎng)物
分泌產(chǎn)物的形式來生產(chǎn)。為了盡可能地降低成本，這些酶只經(jīng)過了
有限的純化工藝。而在另一種極端情況下，用于研究和分析的酶產(chǎn)
品則需要進行高度的純化，以保證污染物的活性不會干擾酶的目的
用途，任何熟悉分子生物學用酶的人都知道，微量的DNA酶或RNA酶
污染可能會造成精心設計的實驗全盤皆輸。
蛋白質(zhì)純化所用的大多數(shù)方法都是在那個時期建立的，至少其原
理是在那時建立的。較近代的進展主要是儀器裝備方面，用來優(yōu)化
每種方法學的應用。分子生物學的快速發(fā)展刺激了儀器裝備的進展
，因為基因產(chǎn)物的分離通常要早于基因的分離。一方面由于使用微
量的蛋白質(zhì)就足以對這些產(chǎn)物進行定性分析(如部分測序)，所以對
大規(guī)模甚至中等規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)方法的需求下降，這樣，設計專門
用于處理毫克至微克范圍蛋白質(zhì)量的現(xiàn)代設備得到了極速的發(fā)展；
而另一方面，使用X射線晶體學和核磁共振(NMR)的結(jié)構(gòu)研究需要幾
百克的純蛋白質(zhì)，因此在實驗室研究中仍然需要大規(guī)模的設備和方
法。
所研究的蛋白質(zhì)性質(zhì)也發(fā)生了很大的變化，盡管酶曾經(jīng)是最熱
的研究對象，但現(xiàn)在已被一些非酶類的蛋白質(zhì)(如生長因子、激素
受體、病毒抗原和膜轉(zhuǎn)運蛋白)所超越。在這些蛋白質(zhì)中，有許多
在天然材料中的含量極微，其純化會成為一項主要的工作。在過去
曾進行了巨大的努力，使用了千克量的起始原料(如人體器官)，而
最后只得到了幾微克的純產(chǎn)物。而現(xiàn)在更通常的做法是使用遺傳學
的方法：在蛋白質(zhì)被純化之前甚至在被正確鑒定之前克隆基因，然
后在適當?shù)乃拗骷毎囵B(yǎng)物或生物中表達，表達水平會比原始材料
高幾個數(shù)量級，這樣會使得純化工作相對簡單。預先知道一些蛋白
質(zhì)的物理特性會很有用，有助于建立適當?shù)募兓桨福瑥闹亟M材料
中純化蛋白質(zhì)。從另一方面講，現(xiàn)在制備融合蛋白的方法很多，可
通過親和技術進行純化，而不必知道目的蛋白的任何性質(zhì)，而且也
有方法對表達產(chǎn)物進行修飾，以進一步簡化純化步驟。
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