本文標題："脂多糖類物質細胞分析圖像顯微鏡"
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脂多糖類物質細胞分析圖像顯微鏡
大量外源蛋白質的生產(chǎn)可能觸發(fā)熱休克反應。熱休克調節(jié)子的響應
將增加蛋白水解活性。在一些情況下，胞內蛋白水解活性導致產(chǎn)品
降解速率等于其生產(chǎn)速率。
更易發(fā)生的是：目標蛋白形成包含體。雖然外源蛋白是包含體
中的主要成分，但通常包含體中也包含一些其他細胞物質。包含體
中的蛋白質發(fā)生了錯誤折疊。錯誤折疊的蛋白質是沒有生物活性的
，也是毫無價值的。如果從培養(yǎng)液中回收包含體，包含體能被重新
溶解并恢復活性(價值)。如果重溶過程很簡單，而且恢復率非常高
，則包含體的形成就是有利的。因為它簡化了回收和純化的起始步
驟。在重溶過程中，用幾種分析方法來檢查蛋白質以確保沒有發(fā)生
化學修飾作用是很重要的。即使一個側鏈基團中的輕微變化也會改
變產(chǎn)品的效用。
生產(chǎn)胞質蛋白質(即非分泌性蛋白)也會產(chǎn)生一些其他非常嚴重
的后果。大腸桿菌中的胞內環(huán)境可能不利于二硫鍵的形成。在大腸
桿菌中，這些蛋白質(外源的)的第一個氨基酸通常是甲硫氨酸，而
在這些蛋白質的固有宿主細胞中，經(jīng)過正常的翻譯后加工，它們的
第一個甲硫氨酸被切掉。如果產(chǎn)物被保留在細胞內，在回收時就必
須裂解(破碎)細胞。細胞裂解通常導致大腸桿菌中內毒素(或熱原
質)的釋放。內毒素是脂多糖類物質(在外膜中)，它能導致不希望
發(fā)生的副作用(例如高燒)，并造成病人死亡。因此，產(chǎn)品純化就是
一個非常重要的考慮因素。
可通過蛋白質分泌和排泄(secretion and excretion)來避免
大腸桿菌的上述許多限制。在這里分泌被定義為蛋白質穿過大腸桿
菌內膜(到達細胞周質)的運輸過程。排泄被定義為蛋白質(從細胞
周質)釋放到胞外的過程。
大腸桿菌中約有20％的總蛋白被運輸穿過內膜而進入細胞周質
空間，或者摻入外膜中。
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