本文標(biāo)題："制備不同含酚濃度耐酚平板培養(yǎng)基-圖像顯微鏡"
發(fā)布者：yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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制備不同含酚濃度耐酚平板培養(yǎng)基-圖像顯微鏡
涂布分離、培養(yǎng)、連續(xù)劃線分離
在無(wú)菌操作下，將采集的含酚污水樣品按適當(dāng)稀釋度稀釋后，涂
布在上面制備的梯度平板上。涂布好的平板置恒溫培養(yǎng)箱30℃培養(yǎng)
2天，平板上生長(zhǎng)的菌落也呈密度梯度分布。在苯酚低濃度區(qū)，高
密度菌落相連結(jié)形成菌苔，而在苯酚高濃度區(qū)則出現(xiàn)稀少菌落。將
苯酚高濃度區(qū)的稀少菌落在含苯酚平板培養(yǎng)基上連續(xù)劃線分離，最
后挑取單菌落接種于苯酚斜面培養(yǎng)基，30 ℃培養(yǎng)2天。
降解性能測(cè)定
1．初篩
制備不同含酚濃度的耐酚平板培養(yǎng)基，苯酚濃度為0．025％。
0．075％，涂布或劃線分離，在平板中苯酚高濃度條件下生長(zhǎng)出的
菌落，即為酚降解能力高的菌株。
2．復(fù)篩
將純化的菌種分別接人含不同酚濃度的耐酚液體培養(yǎng)基錐形瓶
中，30℃振蕩培養(yǎng)，在不同時(shí)間取樣，測(cè)定在600rim處的光密度值
OD600，繪制生長(zhǎng)曲線。以不含酚的碳源(葡萄糖)培養(yǎng)液為對(duì)照。
若與對(duì)照相比，在250mg／L苯酚濃度培養(yǎng)液中生長(zhǎng)速度下降不明顯
，同時(shí)，用4一氨基安替比林法(參閱附錄四)檢測(cè)未接種時(shí)發(fā)酵液
和發(fā)酵終止時(shí)發(fā)酵液的苯酚濃度，計(jì)算降解率，若苯酚降解率>80
％，則表明分離到有效苯酚降解菌株。
菌膠團(tuán)形成能力測(cè)定
1．將上面已分離得到的有效苯酚降解菌株，分別接種在盛有50m
L滅菌的蛋白胨培養(yǎng)基、或尿素培養(yǎng)基的錐形瓶?jī)?nèi)。
2．28℃搖床振蕩培養(yǎng)12～16h，凡能形成菌膠團(tuán)的菌株，培養(yǎng)
物形成絮狀顆粒，靜置后沉積于瓶底，液體澄清。
對(duì)于降解能力較強(qiáng)，且又能形成菌膠團(tuán)的菌株為性能優(yōu)良的苯
酚降解菌株，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后能供生產(chǎn)應(yīng)用。
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