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本文標(biāo)題:"細(xì)胞計數(shù)-緩沖液細(xì)胞染色深受酸堿度(pH)的影響"

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細(xì)胞計數(shù)-緩沖液細(xì)胞染色深受酸堿度(pH)的影響

 
   網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)  用注射器吸取骨髓液滴予煌焦油藍(lán)色膜上,
用玻片覆蓋;或?qū)⑼科V撬枰嘿N于煌焦油藍(lán)色膜上,上下翻
動,直至標(biāo)本與色膜完全溶合混勻為止。10-30 min后,揭開玻片
,用性性質(zhì)。細(xì)胞核染色質(zhì)的核酸與強堿性的組蛋白、精蛋白等形
成核蛋白,這種強堿性物質(zhì)與賴特染料中的酸性染料伊紅有親和力
,故染成紅色;但核蛋白中還有少量的弱酸性蛋白及其氨基,又與
賴特染料中的美藍(lán)起作用,只因其量太少,而不顯藍(lán)色,故細(xì)胞核
呈紫紅色。較幼稚細(xì)胞之胞漿和細(xì)胞核之核仁含有酸性物質(zhì),與賴
特染液中的堿性染料美藍(lán)有親和力,故染成藍(lán)色;當(dāng)酸堿物質(zhì)各半
時,則染成紅藍(lán)色或灰紅色,即所謂多嗜性。
     緩沖液細(xì)胞染色深受酸堿度(pH)的影響。由于各細(xì)胞成分蛋
白質(zhì)的等電點不同,染色親和力也大不相同,蛋白質(zhì)在等電點之上
時,可和陽離子(如堿性染料美藍(lán)等)相結(jié)合;而在等電點之下時,
則和陰離子(如酸性染料伊紅等)相結(jié)合。當(dāng)染色時,若染色液偏堿
性,則細(xì)胞著色偏藍(lán);反之,染色液偏酸性時,則細(xì)胞著色較紅。
為使細(xì)胞染色良好,必須使染色液在一定的pH范圍內(nèi)染色,通常賴
特染液pH值以6.4.6.8為最佳。
 
   沖洗:用自來水沖洗涂片上之染液。要輕輕搖動涂片,使染液
沉渣浮起沖走,切勿先傾去染液再用水沖;否則,涂片上的許多染
料將沉淀于涂膜上。沖洗時間不可過長,水沖力亦不可太大,以防
脫色或涂膜脫落。沖洗后之標(biāo)本豎置在片架上,于空氣中自然干燥
,或用潔凈吸水紙將水吸于。
 

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